技術 新規の抗繊維素溶解化合物

0001

本発明は、式（Ｉ）のスピロ環化合物、その調製方法、並びにこの方法に使用される中間体に関するものである。本発明はまた、それらを含有する医薬組成物又は獣医薬組成物と、医薬における、特に抗繊維素溶解剤及び抗出血剤としてのそれらの使用に関する。

0002

止血系は、循環流動度の維持、及び血管損傷に応答した出血の防止を担っている。生理学的止血は、凝結及び繊維素形成のメカニズムにより、及びフィブリンの分解（繊維素溶解）に有利に働くメカニズムにより制御される。

0003

先天的又は後天的条件により引き起こされる線溶亢進状態は、重要な出血性合併症を起こし易くし、多くの場合、患者の転帰に悪影響を与える輸血及び再診断を必要とする。外傷から２４時間以内に起こる死亡の約５０％、及び手術中の外傷による死亡率の８０％までが出血によるものである。欧米国では、外傷に起因する院内死亡の約３分の１は、大量の輸血を必要とする異常失血により引き起こされており、これは他の死亡原因、特に多臓器不全の重要な要因である。出血している外傷患者の適切な早期治療を開始することができなかったことが、防ぐことのできた外傷死の主な原因である。分娩後出血（ＰＰＨ）は、発展途上国において妊婦の死亡の２５％を占める別の主要な死因であり、先進国では１９９９年の１．５％から２００９年の４．１％へと増加した。出血の危険は、抗凝固療法を受けている心血管疾患患者においても重要である。薬理学的アプローチは、出血及び輸血を減らすことによってそのような状態に関連付けられる特定の問題を改善することを目指す集学的治療法の重要な部分であり；なかでも、繊維素溶解阻害剤の役割が増大しつつある。

0004

外科手術又は大きな外傷に関連して過大に出血し、輸血を必要としている対象者が、全く出血していない対象者より多くの合併症を生じることはよく知られている。しかしながら、ヒトの血液製剤の投与を要する中程度の出血は、ヒトウィルスを移す危険に関連付けられる合併症の原因となりうる。大量の輸血を要する大規模な出血は、肺又は腎臓機能を含む多臓器不全を生じる原因となりうる。したがって、外科手術、並びに大きな組織損傷における主な目標は、出血を回避する又は最小限に抑えることにより、繊維素溶解酵素により容易に溶解しない、安定且つ固形化した止血血栓を確実に形成することである。さらに、このような血栓又は血塊の迅速且つ効果的な形成を確実にすることが重要である。

0005

抗繊維素溶解剤は、繊維素溶解を防ぎ、失血を減らすために大規模な外科手術において広く使用されている。現在、二つの合成リジン類似体、即ちイプシロンアミノカプロン酸（ＥＡＣＡ）、及びトラネキサム酸（ＴＸＡ）だけが、出血を制御するために市販されている抗繊維素溶解剤である。これらの薬剤は、競合的に、フィブリン塊、フィブリノゲン、及び他の血漿タンパク質を分解させる酵素であるプラスミンへの、プラスミノゲンの活性化を阻害する。
しかしながら、血栓性合併症の潜在的危険に起因して、これら現在入手可能な抗繊維素溶解剤に関していくつかの懸案事項がある。

0006

外科手術、外傷、又は他の組織損傷の形態に起因する出血症状を有する対象者を含め、並びに過度の繊維素溶解を特徴とする臨床シナリオにおいて、出血症状を呈している対象者の治療を向上させる必要性が依然として存在する。

0007

本発明者は、良好な抗繊維素溶解特性及び抗出血特性を示す新規のスピロ環化合物系列を着想、生成、及び発見した。特に、ヒドロキサム酸に結合した炭素原子（スピロ原子）とスフホニル基とを含有するスピロ環式環系を含むスピロ環化合物は、血栓弾性率測定法（ｔｈｒｏｍｂｏｅｌａｓｔｏｍｅｔｒｙ）アッセイにおいて、溶解時間に有意な遅延を示す。加えて、本発明のスピロ環化合物は、インビボ動物モデルにおいて出血時間の重要な短縮も示した。これについては後述の実施例において詳細に示す。本発明の化合物のこのような特徴は、出血を迅速に止め；血栓又は血塊の効果的な形成に有利に働き；持続作用（血栓の存続及び出血の防止）を有し；血栓性合併症の危険を有する他の抗繊維素溶解／抗出血治療に関連する副作用を最小に抑えることを助ける。

0008

したがって、本発明の第１の態様は、式（Ｉ）の化合物（以降、本発明の化合物ともいう）、又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体に関連する。

上式中、
Ａ及びＢは、ＡとＢとを連結するスピロ原子が炭素原子であるスピロ環式環系を形成し、ここで
Ａは、飽和した若しくは部分的に不飽和の、既知の炭素環式又は複素環式の単環式３〜８員環であるか；又は代替的に
Ａは、飽和した、部分的に不飽和の、又は部分的に芳香族の、既知の炭素環式又は複素環式の多環式６〜１８員環系であり；
Ｂは、飽和した又は部分的に不飽和の、既知の炭素環式又は複素環式の単環式４〜７員環であり；
Ｃは、フェニル又は既知の５〜６員芳香族複素環であり；
Ｒ１〜Ｒ３は、独立に、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒａ、−ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｙ）Ｒａ’、−ＯＣ（Ｙ）ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｙ）ＮＲｂＲａ’、−ＯＳＯ２ＯＲａ’、−ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｙ）Ｒａ’、−ＮＲｂＣ（Ｙ）ＯＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｙ）ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒａ’、−ＮＲｂＳＯ２ＮＲｂＲａ’、−ＳＲａ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ’、−Ｓ（Ｏ）ＯＲａ’、−ＳＯ２Ｒａ’、−ＳＯ２（ＯＲａ’）、−ＳＯ２ＮＲｂＲａ’、−ＳＣ（Ｙ）ＮＲｂＲａ’、−Ｃ（Ｙ）Ｒａ’、−Ｃ（Ｙ）ＯＲａ’、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｂＲａ’、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｂＯＲａ’、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＳＯ２Ｒａ’から選択され；
Ｒ４〜Ｒ７は、独立に、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒｃ、−ＯＲｃ、−ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｙ）Ｒｃ、−ＮＲｄＣ（Ｙ）ＯＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｙ）ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＳ（Ｏ）２Ｒｃ、−ＮＲｄＳＯ２ＮＲｄＲｃ、−ＳＲｃ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｓ（Ｏ）ＯＲｃ、−ＳＯ２Ｒｃ、−ＳＯ２Ｒ（ＯＲｃ）、−ＳＯ２ＮＲｄＲｃ、−ＳＣ（Ｙ）ＮＲｄＲｃ、−Ｃ（Ｙ）Ｒｃ、−Ｃ（Ｙ）ＯＲｃ、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｄＲｃ、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｄＯＲｃ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＳＯ２Ｒｃから選択され；
Ｒａは、一又は複数の置換基Ｒｅ及び／又は一のＣｙ１で置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ１２）アルキルであるか；又は代替的に、ＲａはＣｙ２であり；
ここで、Ｃｙ１及びＣｙ２は、独立に：一のＣｙ３、及び／又は、一又は複数の置換基Ｒｅ、及び／又は、一又は複数の置換基Ｒｅ及び／又は一のＣｙ３で置換されていてもよい、一又は複数の飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり；且つ
任意のＣｙ３は、Ｒｅ、及び、一又は複数の置換基Ｒｅで置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから独立に選択される、一又は複数の置換基で置換されていてもよく；
各Ｒａ’及びＲｂは、独立に、Ｈ又はＲａであり；
Ｒｃ及び各Ｒｄは、独立に、Ｈ、Ｃｙ４、及び、一又は複数の置換基Ｒｈ及び／又は一のＣｙ５で置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択され；
ここで、Ｃｙ４は、Ｒｈ、及び、一又は複数の置換基Ｒｈで置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから独立に選択される、一又は複数の置換基で置換されていてもよく；且つ
Ｃｙ５は、Ｒｈ、及び、一又は複数の置換基Ｒｈで置換されていてもよい飽和又は不飽和の（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから独立に選択される、一又は複数の置換基で置換されていてもよく；
各Ｒｅは、独立に、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲｆ、−ＯＣ（Ｙ）Ｒｆ、−ＯＣ（Ｙ）ＯＲｆ、−ＯＣ（Ｙ）ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＣ（Ｙ）Ｒｆ、−ＮＲｇＣ（Ｙ）ＯＲｆ、−ＮＲｇＣ（Ｙ）ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｆ、−ＮＲｇＳＯ２ＮＲｇＲｆ、−ＳＲｆ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｆ、−Ｓ（Ｏ）ＯＲｆ、−ＳＯ２Ｒｆ、−ＳＯ２（ＯＲｆ）、−ＳＯ２ＮＲｇＲｆ、−ＳＣ（Ｙ）ＮＲｇＲｆ、−Ｃ（Ｙ）Ｒｆ、−Ｃ（Ｙ）ＯＲｆ、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｇＲｆ、−Ｃ（Ｙ）ＮＲｇＯＲｆ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｇＳＯ２Ｒｆから選択され；
Ｒｆ及び各Ｒｇは、独立に、Ｈ、Ｃｙ６、及び、一又は複数の置換基Ｒｈ及び／又は一のＣｙ７で置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択され；
ここで、Ｃｙ６は：一のＣｙ７、及び／又は、一又は複数の置換基Ｒｅ、及び／又は、一又は複数の置換基Ｒｈ及び／又はＣｙ７で置換されていてもよい一又は複数の飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基で置換されていてもよく；且つ
任意のＣｙ７は、Ｒｈ、及び、一又は複数の置換基Ｒｈで置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから独立に選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく；
各Ｒｈは、独立に、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲｉ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｉ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｉ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）Ｒｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）ＯＲｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＳ（Ｏ）２Ｒｉ、−ＮＲｉＳＯ２ＮＲｉＲｉ、−ＳＲｉ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｉ、−ＳＯ２Ｒｉ、−ＳＯ２（ＯＲｉ）、−ＳＯ２ＮＲｉＲｉ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｉ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｉ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｉＲｉ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｉＯＲｉから選択され；
各Ｒｉは、独立に、Ｈ、又は一又は複数のハロゲン原子で置換されていてもよい−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｙは、Ｏ、Ｓ、又はＮＲｉであり；
Ｃｙ１、Ｃｙ２、Ｃｙ４及びＣｙ６は、独立に、飽和した又は部分的に不飽和の、炭素環式又は複素環式の単環式３〜８員環；５又は６員芳香族複素環；及び、飽和した、部分的に不飽和の、芳香族の、又は部分的に芳香族の、炭素環式又は複素環式の多環式６〜１８員環系から選択される、Ｃ又はＮに結合した既知の環系であり；
Ｃｙ３、Ｃｙ５、及びＣｙ７は、独立に、飽和した又は部分的に不飽和の、炭素環式又は複素環式の単環式３〜８員環；フェニル；及び５又は６員芳香族複素環から選択される、Ｃ又はＮに結合した既知の環系であり；
ここで、炭素環式環内ではすべての環員は炭素原子であり；複素環式環及び芳香族複素環内では、一又は複数の環員は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、すべての飽和した又は部分的に不飽和の環内では、環の１又は２員は、任意選択的に、Ｃ（Ｏ）、及び／又はＣ（ＮＨ）、及び／又はＣ［Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル］である。

0009

本発明の別の態様は、上記に定義された式（Ｉ）の化合物の有効量、又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体を、一又は複数の薬学的に若しくは獣医薬的に言許容可能な賦形剤若しくは担体と共に含む、医薬又は獣医薬組成物に関する。

0010

前述のように、本発明の化合物は、抗繊維素溶解剤及び抗出血剤として有用である。したがって、本発明の別の態様は、薬物としての使用のための、上記に定義された式（Ｉ）の化合物、又は、その薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体に関する。

0011

本発明の別の態様は、抗繊維素溶解剤及び抗出血剤としての使用のための、上記に定義された式（Ｉ）の化合物、又は、その薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体に関する。したがって、この態様は、抗繊維素溶解剤及び抗出血剤としての使用のための薬物の製造のための、上記に定義された式（Ｉ）の化合物の使用に関し；さらには繊溶亢進及び／又は出血の治療及び／又は予防のための方法として定式化することができ、この方法は、上記に定義される化合物（Ｉ）の有効量、又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体と、一又は複数の薬学的若しくは獣医薬的に許容可能な賦形剤若しくは担体とを、ヒトを含むそれを必要とする対象に投与することを含む。

0012

式（Ｉ）の化合物の調製方法、並びにこのような方法に使用される中間体も、本発明の一部である。したがって、本発明の別の態様は、式（ＩＩＩ）の化合物に関する。

上式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７は、上記に定義されたとおりであり、Ｒ’は、Ｈ、又はカルボキシ保護基、具体的には、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ベンジル、ｐ−メトキシフェニル、トリメチルシリル、及び［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチル（ＳＥＭ）からなる群より選択されるカルボキシ保護基であり、但し、化合物（ＩＩＩ）は、７−メトキシカルボニル−７−フェニルスルホニル−２−オキサスピロ［２．４］−ヘプタン、及び（２Ｓ＊，４Ｒ＊）−２−フェニルスルホニル−４−ヨードメチル−６，１１−ジオキサスピロ［４．６］−ウンデカン−２−カルボン酸メチルエステルではない。

0013

本発明の別の態様は、式（ＩＩ）の化合物に関する。

上式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７は、上記に定義された通りであり、Ｒは、ヒドロキサム酸保護基、具体的には、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ（ＴＨＰ）、ベンジル、１−ナフチルメチル、及びジメチルオキシベンジル（ＤＭＢ）からなる群より選択されるヒドロキサム酸保護基である。

0014

本明細書において使用されるすべての用語は、特に指定のない限り、当技術分野において知られている一般的な意味で理解されたい。本明細書において使用される特定の用語の、他のさらに詳細な定義は、後述において規定され、特に明確に規定される定義によってさらに広い定義が提供されない限り、本明細書全体にわたって一様に適用される。

0015

本発明の目的のために、環系Ａ及び環系Ｂにより形成されるスピロ環式の環系では、ＡとＢとを連結するスピロ原子は炭素原子である。

0016

用語「炭素環式」の環系は、すべての環員が炭素原子である既知の環系を指す。用語「複素環式」の環系は、環員の一又は複数、好ましくは１、２、３、又は４の環員が、化学的に可能であれば、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される、既知の環系を指す。特に指定のない限り、「複素環式」の環系は、Ｃ又はＮ原子により残りの分子に結合してもよい。炭素環式及び複素環式の環は共に、飽和していても、又は部分的に不飽和でもよく、置換されなくても、置換基が任意の可能な位置に位置して、本明細書に記載のように置換されていてもよい。

0017

本発明によれば、用語「多環式」の環は、縮合、架橋縮合スピロ縮合することができるか、又は異なる種類の縮合を含むことができる、二、三、又は四の環により形成される環系を指す。本発明の目的のために、「縮合」環では、縮合は、二の隣接する環に共通の一の結合により生じ；「架橋縮合」環では、縮合は、二の環に共通の一連の原子（橋頭）により生じ；「スピロ縮合」環では、縮合は、二の隣接する環（架橋環を含む）に共通の一の原子（スピロ原子）、好ましくは炭素原子のみにより生じる。

0018

多環式の環系は、飽和していても、部分的に不飽和でも、芳香族（環系Ａの場合を除く）でも、又は部分的に芳香族でもよく；置換されなくても、置換基が任意の可能な位置に位置して、本明細書に記載のように置換されていてもよい。

0019

用語「芳香族複素」環は、一又は複数の環員、好ましくは１、２、３、又は４の環員が、化学的に可能であればＮ、Ｏ、及びＳから選択される、既知の芳香族環系を指す。芳香族複素環及びフェニルは、置換されなくても、置換基が任意の可能な位置に位置して、本明細書に記載のように置換されていてもよい。

0020

本明細書において使用される用語「既知の」環系は、化学的に可能で、当技術分野において知られている環系を指し、したがって化学的に可能でない環系を除くことを意図している。

0021

本発明の目的のために、すべての飽和した又は部分的に不飽和の環では、一又は二の環員は、任意選択的に、Ｃ（Ｏ）及び／又はＣ（ＮＨ）、及び／又はＣ［Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル］である。

0022

用語飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃｎ）アルキルは、１〜ｎの炭素原子を含む飽和した分枝又は線状の炭化水素鎖を指す。（Ｃ１−Ｃｎ）アルキルが飽和しているとき、それは単結合のみを含有する。（Ｃ１−Ｃｎ）アルキルが不飽和であるとき、それは、一又は二の二重結合、及び／又は一又は二の三重結合を含有する。飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃｎ）アルキルは、本明細書に記載のように、置換されても未置換でもよい。

0023

ハロゲン置換基は、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードを意味する。

0024

「保護基」（ＰＧ）は、分子マスク内の反応基に結合するとその反応性を低減又は防止する原子の集団を指す。

0025

「一又は複数の〜で置換」されるという表現は、一の基が、置換されうる十分な位置を有していることを条件に、一又は複数、好ましくは１、２、３、又は４の置換基で置換されうることを意味する。

0026

本発明の目的のために、室温は２０〜２５℃である。

0027

上述のように、本発明の第１の態様は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体に関連する。治療目的で使用されるとき、薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能である限り、使用可能な塩の種類に制限はない。用語「薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩」は、アルカリ金属塩を形成するため、及び遊離酸又は遊離塩基の付加塩を形成するために共通に使用される塩を含む。

0028

式（Ｉ）の化合物の薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の調製は、当技術分野において既知の方法により実行することができる。例えば、それらは、従来の化学的方法により、塩基性又は酸性の成分を含む親化合物から調製することができる。一般に、このような塩は、例えば、これら化合物の遊離酸又は塩基形態を、水又は有機溶媒又はこれらの混合物の中で、適切な薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩基又は酸の化学量論的量と反応させることにより調製される。式（Ｉ）の化合物及びそれらの塩は、いくつかの物理的特性を異にすることがあるが、本発明の目的のためには等価である。

0029

本発明の化合物は、遊離溶媒化化合物又は溶媒和物（例えば、水和物）としての結晶形態とすることができ、両形態を本発明の範囲に含むことが意図されている。溶媒化の方法は、本技術分野において広く知られている。一般に、水、エタノールなどの、薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な溶媒による溶媒化形態は、本発明の目的のために、非溶媒化形態と等価である。

0030

式（Ｉ）のいくつかの化合物は、種々の立体異性体を生じさせうるキラル中心を有することができる。本発明は、これら立体異性体の各々と、その混合物とに関連する。さらに、本発明の化合物のいくつかは、シス／トランス異性体を示しうる。本発明は、幾何異性体の各々と、その混合物とに関する。

0031

ジアステレオ異性体は、クロマトグラフィー又は分別結晶といった従来の技術により分離可能である。光学異性体は、光学的に純粋な異性体を生じさせるための光学的分解の従来技術により分割することができる。このような分割は、任意のキラル合成中間体又は一般式（Ｉ）の生成物に対して実行することができる。光学的に純粋な異性体は、エナンチオ選択的合成を用いて個別に得ることもできる。

0032

一実施態様では、本発明は、上述に定義された式（Ｉ）の化合物であって、Ａが、既知の炭素環式又は複素環式の単環式３〜８員環であるか、又は既知の炭素環式又は複素環式の二環式６〜１０員環系である式（Ｉ）の化合物に言及する。

0033

別の実施態様では、本発明は、Ａが、炭素環式３〜６員環、及び複素環式５〜６員環から選択される単環式の環である、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0034

別の実施態様では、本発明は、Ａが、炭素環式の単環；又は環がヒドロキサム酸に結合するスピロ原子を含有し、スルホニル基が炭素環式の環である、多環式の環系、好ましくは二環式の環系である、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0035

別の実施態様では、本発明は、Ａが、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、テトラヒドロフラン、ピロリジン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン、ヘキサヒドロピロリジン−３−オン、及び４−アザスピロ［４．４］ノナンから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0036

別の実施態様では、本発明は、Ａが未置換である、即ちＲ７がＨである、式（Ｉ）の化合物に関する。

0037

別の実施態様では、本発明は、Ｂが、炭素環式又は複素環式の単環式６〜７員環である、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0038

別の実施態様では、本発明は、Ｂが、炭素環式又は複素環式の、飽和した単環式の環であり、複素環式環の環員の少なくとも一がＮＲ４である、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0039

別の実施態様では、本発明は、Ｂが、シクロヘキサン、ピペリジン、モルホリン、アゼパン、ピペリジン、ピロリジン、及びアゼチジンから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0040

別の実施態様では、Ｂは、ピペリジン、モルホリン、アゼパン、ピロリジン、及びアゼチジンであり、ここでＲ４はこれらの環のＮ原子上に位置し、Ｒ５〜Ｒ６はＨである。別の実施態様では、Ｂはピペラジンであり、ここでＲ４及びＲ５はＮ原子上に位置し、Ｒ６はＨである。

0041

別の実施態様では、本発明は、Ａ及びＢが、以下のものからなる群より選択されるスピロ環式環を形成する、式（Ｉ）の化合物に言及する：

0042

別の実施態様では、本発明は、Ｃがフェニルである式（Ｉ）の化合物に言及する。別の実施態様では、Ｃは、オルト、メタ、又はパラ位置においてＲ１で置換されるフェニルであり、Ｒ２及びＲ３は、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒａ、−ＯＲａ’、及び−ＮＲｂＲａ’から選択され；Ｒａ、Ｒａ’、及びＲｂは、独立に、Ｈ、及び一又は複数のハロゲン原子で置換されていてもよい−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルである。別の実施態様では、Ｃは、パラ位置においてＲ１で置換されるフェニルであり、Ｒ２及びＲ３はＨである。別の実施態様では、Ｃは、オルト位置においてＲ１で置換されるフェニルであり、Ｒ２及びＲ３はＨである。別の実施態様では、Ｃは、メタ位置においてＲ１で置換されるフェニルであり、Ｒ２及びＲ３はＨである。別の実施態様では、Ｃは、メタ位置においてＲ１で、パラ位置においてＲ２で置換されるフェニルであって、Ｒ３がＨであるか；又は代替的に、Ｃは、パラ位置においてＲ１で、メタ位置においてＲ２で置換されるフェニルであって、Ｒ３がＨであり；ここで、Ｒ２は、Ｈ、ハロゲンＲａ、−ＯＲａ’、及び−ＮＲｂＲａ’から選択され；且つＲａ、Ｒａ’、及びＲｂは、独立に、Ｈ、及び一又は複数のハロゲン原子で置換されていてもよい−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される。

0043

別の実施態様では、本発明は、Ｒｂ（Ｒ１〜Ｒ３に関連して）においてＣｙ１及びＣｙ２が、独立に、Ｒｅ、及び、一又は複数の置換基Ｒｅで置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく；Ｃｙ６が、Ｒｈ、及び、上記に規定されるように、具体的には一又は複数の置換基Ｒｈで置換されていてもよい、飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから独立に選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0044

さらに詳細な実施態様では、本発明は、Ｒｂ（Ｒ１〜Ｒ３に関連して）において、ＲｂはＨであって、一又は複数の置換基Ｒｅで置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ１２）アルキルであり、さらに詳細には、Ｒｅにおいて、Ｒｆ及び各Ｒｇは、独立に、Ｈ、及び一又は複数のフッ素原子で置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0045

別の実施態様では、本発明は、Ｒ１〜Ｒ３において、Ｒｅが、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲｆ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｆ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｆ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＣ（Ｏ）Ｒｆ、−ＮＲｇＣ（Ｏ）ＯＲｆ、−ＮＲｇＣ（Ｏ）ＮＲｇＲｆ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｆ、−ＳＲｆ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｆ、−ＳＯ２Ｒｆ、−ＳＯ２ＮＲｇＲｆ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｆ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｇＲｆ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｇＯＲｆから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0046

別の実施態様では、本発明は、Ｒ１〜Ｒ３において、Ｒｆ及び各Ｒｇが、独立に、Ｈ、及び一又は複数のフッ素原子で置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0047

別の実施態様では、本発明は、Ｒ１〜Ｒ３において、Ｃｙ１及びＣｙ２が、Ｒｅ、及び、上記に規定されるように置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択される一又は複数の置換基で独立に置換されていてもよく；Ｃｙ６が、Ｒｈ、及び上記に規定されるように置換されていてもよい飽和又は不飽和（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから独立に選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0048

別の実施態様では、本発明は、Ｒ１〜Ｒ３が、独立に、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒａ、−ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ’、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、 −ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒａ’、−ＳＲａ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ’、−ＳＯ２Ｒａ’、−ＳＯ２ＮＲｂＲａ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＯＲａ’から選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0049

別の実施態様では、本発明は、Ｒ４〜Ｒ７において、Ｒｈが、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲｉ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｉ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｉ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）Ｒｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）ＯＲｉ、−ＮＲｉＣ（Ｏ）ＮＲｉＲｉ、−ＮＲｉＳ（Ｏ）２Ｒｉ、−ＳＲｉ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｉ、−ＳＯ２Ｒｉ、−ＳＯ２ＮＲｉＲｉ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｉ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｉ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｉＲｉから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0050

別の実施態様では、本発明は、Ｒ４〜Ｒ７が、独立に、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒｃ、−ＯＲｃ、−ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＳ（Ｏ）２Ｒｃ、−ＳＲｃ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃ、−ＳＯ２Ｒｃ、−ＳＯ２ＮＲｄＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｃ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｃから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0051

別の実施態様では、本発明は、Ｒ２及びＲ３が、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒａ、−ＯＲａ’、及び−ＮＲｂＲａ’から選択され；Ｒ５〜Ｒ７が、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒｃ、−ＯＲｃ、及び−ＮＲｄＲｃから選択され、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂ、Ｒｃ、及びＲｄが、独立に、Ｈ、及び一又は複数のフッ素原子で置換されていてもよい−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0052

別の実施態様では、本発明は、Ｒ１が、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒａ、−ＯＲａ’、−ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ’、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲａ’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒａ’、−ＳＲａ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ’、−ＳＯ２Ｒａ’、−ＳＯ２ＮＲｂＲａ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲａ’、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＯＲａ’から選択され；Ｒ４が、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、Ｒｃ、−ＯＲｃ、−ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｃ、−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｃ、−ＮＲｄＳ（Ｏ）２Ｒｃ、−ＳＲｃ、−Ｓ（Ｏ）Ｒｃ、−ＳＯ２Ｒｃ、−ＳＯ２ＮＲｄＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｃ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｃから選択され；Ｒ２、Ｒ３、及びＲ５〜Ｒ７が、独立に、Ｈ、ハロゲン、−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＯＨ、−Ｏ［（Ｃ１−Ｃ４）アルキル］、−ＮＨ２、−ＮＨ［（Ｃ１−Ｃ４）アルキル］、−Ｎ［（Ｃ１−Ｃ４）アルキル］２から選択され、ここで各（Ｃ１−Ｃ４）アルキルは、独立に、一又は複数のフッ素原子で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に言及する。

0053

本発明は、変数Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＲ１〜Ｒ７のいずれかについて上記に規定された特定の実施態様のいずれかの組合せにも関する。

0054

本発明の別の実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、以下のものからなる群より選択される：









＊これら化合物に関し、絶対配置を同定しようという試みは行われなかった。しかしながら、実施例では、二つの異性体を物理的及び／又は分光学的特性を明確に識別することにより、それらのうちのどちらが相対的に考慮されているかが明瞭に示される。

0055

一般に、上記に規定された式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物

を、式ＲＯ−ＮＨ２（ＩＶ）のヒドロキシルアミンと反応させて（ここでＡ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７は、上記に規定した通りであり；Ｒ’はＨであり；Ｒはヒドロキサム酸保護基、具体的には、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ（ＴＨＰ）、ベンジル、１−ナフチルメチル、及びジメチルオキシベンジル（ＤＭＢ）からなる群より選択されるヒドロキサム酸保護基である）、式（ＩＩ）の化合物

を生じさせ、続いて、式（Ｉ）の化合物を生じさせるために、ヒドロキサム酸の保護基を除去することにより取得される。

0056

第１の変換は、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）といった活性化剤の存在下において、好ましくは、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）といった塩基の存在下において、ジクロロメタン、クロロホルム、又はジメチルホルムアミドといった適切な溶媒中において、室温から溶媒の沸点までを含む温度で、好ましくは室温で、実行することができる。

0057

ヒドロキサム酸の保護基の除去は、例えば、T. W. Green and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry (Wiley, 3rd ed. 1999, Chapter 2, pp. 17-200)に記載のような当技術分野において周知の標準的な方法により実行される。代表的なヒドロキシ保護基には、ヒドロキシ基が、アシル化されているか、又はベンジルのようにアルキル化されているもの、トリチルエーテル、並びにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル、及びアリルエーテルが含まれる。例えば、ヒドロキサム酸保護基は、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ（ＴＨＰ）、ベンジル、１−ナフチルメチル、又はジメチルオキシベンジル（ＤＭＢ）である。ヒドロキサム酸保護基がＴＨＰであるとき、脱保護は、ジオキサンのような適切な溶媒中において、例えばＨＣｌを含む、酸性媒質中で実行される。

0058

Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７、及びＲが上記に規定された通りである式（ＩＩ）の中間化合物も、本発明の一部を形成する。

0059

Ｒ’がＨである式（ＩＩＩ）の化合物は、Ｒ’がカルボキシ保護基である式（ＩＩＩ）の化合物の保護基を、例えばT. W. Green and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry (Wiley, 3rd ed. 1999, Chapter 5, pp. 369-451)に記載されているような当技術分野において周知の標準的な方法により除去することで得ることができる。代表的なカルボキシ保護基には、アルキル、アリール又はベンジルエステル、シリルエステル、アミド、又はヒドラジドが含まれる。例えば、カルボキシ保護基は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ベンジル、ｐ−メトキシフェニル、トリメチルシリル、又は［２−（トリメチルシリル）−エトキシ］メチル（ＳＥＭ）である。カルボキシ保護基が（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであるとき、脱保護は、テトラヒドロフラン−メタノールのような適切な溶媒中において例えばＬｉＯＨを含む塩基性媒体中で実行される。

0060

Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７が上記に規定されるとおりのものであり、Ｒ’が、Ｈ、又はカルボキシ保護基、具体的には
（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ベンジル、ｐ−メトキシフェニル、トリメチルシリル、及び［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチル（ＳＥＭ）からなる群より選択されるカルボキシ保護基である式（ＩＩＩ）の中間化合物も本発明の一部を形成し、但し、化合物（ＩＩＩ）は、７−メトキシカルボニル−７−フェニルスルホニル−２−オキサスピロ［２．４］ヘプタン、及び（２Ｓ＊，４Ｒ＊）−２−フェニルスルホニル−４−ヨードメチル−６，１１−ジオキサスピロ［４．６］ウンデカン−２−カルボン酸メチルエステルではない。これら化合物は、D. Bouyssi et al., "Rearrangement of oxaspiroheptanes to cyclohexanones mediated by lithium iodide", Synlett 2000, vol. 5, pp. 749-751 and Osamu Kitagawa et al., "Stereoselective Iodine Atom Transfer [3 + 2] Cycloaddition Reaction with Alkenes Using Unsyｍｍetrical Allylated Active Methine RadicaIs", The Journal of Organic Chemistry 2004, vol. 69, pp. 2607-2610にそれぞれ挙げられているが、これら文献には合成方法が記載されているのみで、治療的適用については何も記載されていない。
式（ＩＩ）及び式（ＩＩＩ）の中間化合物の化学構造が、式（Ｉ）の最終化合物の化学構造と概ね一致するとすれば、変数Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＲ１〜Ｒ７に関して式（Ｉ）の化合物について上記に規定された特定の実施態様は、式（ＩＩ）及び式（ＩＩＩ）の中間化合物の特定の実施態様でもある。

0061

式（ＩＩＩ）の化合物は、一般に、式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と結合させることにより得ることができる：

上式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｒ１〜Ｒ７は上記に規定された通りであり、Ｒ’はカルボキシ保護基である。このような変換は、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）のような塩基の存在下において、テトラヒドロフランのような適切な溶媒中で、且つ適切な温度、好ましくは−７８℃で実行される。

0062

加えて、Ｒ１がＱ−Ｃｙ２であり、ここでＱがＯ、Ｓ、ＳＯ、又はＳＯ２であり、且つＣｙ２が上記に規定された通り（即ち、式（Ｉａ）の化合物）である式（Ｉ）の化合物は、一般に以下のスキームに示されるようにして得られる：

0063

Ａ、Ｂ、Ｒ４〜Ｒ７が上記に規定されたとおりであり、Ｒ’がカルボキシ保護基である式（Ｖ）の化合物を、上記のように、Ｃ、Ｒ２、及び３が上記に規定された通りである式（Ｖ１ａ）の化合物と反応させて式（ＩＩＩａ）の化合物を生じさせ、式（ＩＩＩ）の化合物を、脱保護して式（ＩＩＩｂ）のカルボン酸を生じさせ、続いて先述のように式（ＩＶ）の化合物と反応させて化合物（ＩＩａ）を生じさせる。

0064

式（ＩＩａ）の化合物を、Ｑ’がＯ又はＳであり、且つＣｙ２が上記に規定された通りである式（ＶＩＩ）の化合物と反応させて式（ＩＩｂ）の化合物を生じさせる。この反応は、炭酸セシウムのような塩基の存在下で、任意選択的に適切な溶媒中で又は溶媒なしで、好ましくは加熱しながら実行される。

0065

さらに、ＱがＳである式（ＩＩｂ）の化合物を、メタクロロ過安息好酸のような酸化剤の存在下で、ジクロロメタンのような適切な溶媒中において、且つ好ましくは室温で、ＱがＳＯ又はＳＯ２である式（ＩＩｂ）の化合物へと酸化させることができる。

0066

式（ＩＩｂ）の化合物の脱保護は、上記のように式（Ｉａ）に規定されるような化合物を産む。

0067

加えて、Ｒ１がＱ−ａｌｋであり、ＱがＯ又はＳであり、且つ、ａｌｋが、置換されていてもよい飽和又は不飽和−（Ｃ１−Ｃ１２）アルキルである式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｂ）の化合物）は、以下のスキームに示されるようにして得られる：

0068

すなわち、式（ＩＩａ）の化合物を、ＮａＨのような塩基の存在下において、任意選択的に適切な溶媒中で又は溶媒なしで、好ましくは加熱しながら、式Ｈ−Ｑ−ａｌｋ（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させることができる。結果として得られる式（ＩＩｃ）の化合物の保護基の除去後、式（Ｉｂ）の化合物が得られる。

0069

Ｒ１が−ＮＲｂＲａ’であり、Ｒｂが、置換されていてもよい飽和又は不飽和の−（Ｃ１−Ｃ１２）アルキルであり、且つＲａ’が、Ｈ、又は、置換されていてもよい飽和又は不飽和の−（Ｃ１−Ｃ１２）アルキルである式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｃ）の化合物）は、一般に、以下のスキームに示されるようにして得られる：

0070

すなわち、式（ＩＩａ）の化合物を、任意選択的に適切な溶媒中で又は溶媒なしで、好ましくは加熱しながら、式Ｈ−ＮＲｂＲａ’（ＩＸ）の化合物と反応させることができる。結果として得られる式（ＩＩｄ）の化合物の保護基の除去後、式（Ｉｃ）の化合物が得られる。

0071

Ｒ１が−ＮＣｙ２Ｒａ’であり、Ｃｙ２が置換されていてもよい芳香環、芳香族複素環、又は脂肪族環である式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｄ）の化合物）は、一般に、以下のスキームに示されるようにして得られる：

0072

すなわち、式（ＩＩａ）の化合物を、任意選択的に適切な溶媒中で又は溶媒なしで、好ましくは加熱しながら、式Ｈ−ＮＣｙ２Ｒａ’（Ｘ）の化合物と反応させることができる。結果として得られる式（ＩＩｅ）の化合物の保護基の除去後、式（Ｉｄ）の化合物が得られる。

0073

Ｒ１が−ＮＲｂＣ（Ｙ）Ｒａ’、−ＮＲｂＣ（Ｙ）ＯＲａ’、−ＮＲｂＣ（Ｙ）ＮＲｂＲａ、−ＮＲｂＳ（Ｏ）２Ｒａ’、−ＮＲｂＳＯ２ＮＲｂＲａ’である式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｅ）の化合物）は、式（ＩＩｇ）の化合物から得られ、式（ＩＩｇ）の化合物は、以下のスキームに示されるようにして調製することができる：

0074

第１の工程では、式（ＩＩａ）の化合物を、好ましくは加熱しながらベンジルアミンと反応させて式（ＩＩｆ）の化合物を生じさせ、式（ＩＩｆ）の化合物をＰｄ／Ｃの存在下で水素化することにより式（ＩＩｇ）の化合物を生じさせることができる。この化合物を、トリエチルアミンのような塩基の存在下で、テトラヒドロフランのような適切な溶媒中で、室温から溶媒の還流温度にわたる温度で、例えばハロゲン化アシルと反応させてアミドを生じさせる；又はイソシアネートと反応させて尿素を生じさせることができる。

0075

Ｒ１が−ＯＣ（Ｙ）Ｒａ’である式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｆ）の化合物）は、式（ＩＩｉ）の化合物から得られ、式（ＩＩｉ）の化合物は、以下のスキームに示されるようにして調製することができる：

0076

第１の工程では、式（ＩＩａ）の化合物を、ＮａＨのような塩基の存在下で、テトラヒドロフランのような適切な溶媒中で、ベンジルアルコールと反応させて式（ＩＩｈ）の化合物を生じさせ、式（ＩＩｈ）の化合物をＰｄ／Ｃの存在下で水素化することにより式（ＩＩｉ）の化合物を生じさせることができる。この化合物を、トリエチルアミンのような塩基の存在下で、適切な溶媒中で、好ましくは室温で、例えばハロゲン化アシルと反応させることにより、エステルを生じさせることができる。

0077

Ｒ１がＲａである式（Ｉ）の化合物（即ち、式（Ｉｇ）の化合物）は式（ＩＩｋ）の化合物から得られ、式（ＩＩｋ）の化合物は、以下のスキームに示されるようにして調製することができる：

0078

第１の工程では、式（ＩＩｇ）の化合物を、アセトニトリルのような適切な溶媒中において、ヨウ化カリウム及びＮａＮＯ２と反応させ、次いで濃縮ＨＣｌのような酸を添加して、式（ＩＩｊ）の化合物を招じさせる。この化合物を、パラジウム触媒の存在下において、例えばボロン酸誘導体と反応させることにより（鈴木カップリング）、式（ＩＩｋ）の化合物を生じさせることができる。

0079

Ｒ１について上記に示した同種の反応をＲ２〜Ｒ７に適用することができる。

0080

別法では、上記の反応は、異なる順序で実行することができる。即ち、式（ＩＩ）の化合物に対して（即ち、保護されたヒドロキサム酸に対して）実行される反応は、式（ＩＩＩ）の化合物（即ち、カルボン酸エステル）に対して実行することができ、脱保護することにより対応するカルボン酸を招じさせることができ、カルボン酸は上記のようにして式（Ｉ）の化合物に変換することができる。

0081

式（Ｖ）〜（ＸＩ）の化合物は、市販されているか、又は従来の合成方法により得ることができる。

0082

本発明はまた、上記に規定された式（Ｉ）の化合物の有効量、又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な塩の任意の立体異性体を、薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な賦形剤若しくは担体と共に含む薬学的若しくは獣医薬的組成物に関連する。

0083

本明細書で用いられる「有効量」という表現は、投与されると、標的疾患の症状のうちの一又は複数の発生を予防するか、又は標的疾患の症状のうちの一又は複数をある程度軽減するために十分な化合物の量を指す。治療的有用性を得るための本発明の化合物の特定の用量は、なかでも患者のサイズ、体重、年齢、及び性別、疾患の性質及び段階、疾患の悪性度、及び投与経路を含む、個々の患者の特定の状況に応じて決まる。例えば、約０．０１〜約３００ｍｇ／ｋｇの用量が使用される。

0084

「薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な賦形剤若しくは担体」という表現は、薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能な物質、組成物、又は媒体を指す。各構成成分は、薬学的若しくは獣医薬的組成物の他の成分と適合性であるという意味で、薬学的に若しくは獣医薬的に許容可能でなければならない。また、各構成成分は、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応、免疫原性、若しくは他の問題なしで、又は妥当な有用性／リスク比を打ち消すような合併症なしで、ヒト及び動物の組織又は器官に接触させて使用するために適していなければならない。

0085

薬学的又は獣医薬的製剤の選択は、活性化合物の性質及びその投与経路によって行われるであろう。任意の投与経路、例えば経口、非経口、及び局所的投与を使用することができる。

0086

例えば、医薬組成物又は獣医薬組成物は、経口投与のために製剤化されてよく、一又は複数の生理的に適合性の担体又は賦形剤を、固体又は液体形態で含むことができる。これらの調整物は、結合剤、注入剤、潤滑剤、及び許容可能な湿潤剤といった従来の成分を含むことができる。

0087

医薬組成物若しくは獣医薬組成物は、水又は適切なアルコールといった従来の注入可能な液体担体と組み合わせた非経口投与のために製剤化することができる。注入のための従来の医薬又は獣医薬賦形剤、例えば安定化剤、可溶化剤、及びバッファーは、このような組成物に含まれうる。これらの医薬又は獣医薬組成物は、筋肉内、腹腔内、又は静脈内に注入することができる。

0088

医薬又は獣医薬組成物は、局所投与のために製剤化されてもよい。製剤には、化合物が適切な賦形剤中に分散又は溶解されるクリーム、ローション、ジェル、粉末、溶液、及びパッチが含まれる。本発明の局所組成物は、固体支持体とすることができる担体物質を用いて投与されてもよい。したがって、固体支持体とすることができる担体材料を含む局所組成物も、本発明の一部を形成する。固体支持体の説明的で非限定的な例には、インテリジェントテキスタイル、ドレッシング材、コーティング、スポンジ、バンドエイド、生理用ナプキン、圧定布、ギプスなどが含まれる。このような組成物の製造物は、従来の方法、例えば、本発明の組合せと材料担体とを混合することにより得ることができる。

0089

医薬又は獣医薬組成物は、なかでも、短時間で又は遅延させて放出するための、使用前の、水若しくは他の適切な液体媒体との再構成に適した、錠剤、ペレット、カプセル、水性又は油性溶液、懸濁液、乳濁液、又は乾燥粉末形態を含む任意の形態にすることができる。

0090

適切な賦形剤及び／又は担体と、それらの量は、当業者であれば、調製される製剤の種類に応じて容易に決定することができる。

0091

本発明の化合物は、抗出血剤及び抗繊維素溶解剤として有用であり、広い範囲の治療用途に使用することができる。外科手術において、抗繊維素溶解剤は、術後出血を低減することに加え、例えば心臓、肝臓、及び整形外科手術において、さらには繊維素溶解活性化因子に富む器官（前立腺、子宮）における腫瘍外科手術の環境において、輸血及び他のヘモデリバティブ（ｈｅｍｏｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）の代替物になりえる。外傷患者において、抗繊維素溶解剤は、全死因死亡率及び出血に起因する死亡を低減することができる。さらに、本発明の抗繊維素溶解剤は、血栓溶解療法における、例えば、急性心発作及び虚血発作、並びに大出血又は頭蓋内出血の場合の出血を制御するために使用することもできる。さらには、本発明の抗繊維素溶解剤は、特に血友病のような先天的凝血障害を有する患者、又は糖尿病患者における、例えば抜歯後の、局所出血の処置；先天性又は後天性凝血障害に関連付けられる女性の月経過多、及び分娩後出血の治療、並びに前立腺切除を含む非尿器官及び胃腸器官の出血の処置に有用である。

0092

明細書及び特許請求の範囲を通じ、「含む」及びその変形形態は、他の技術的特徴、付加物、構成成分、又は工程を除外することを意図しない。さらに、「含む」という言葉は、「〜から構成される」という場合も包含する。本発明の他の目的、利点、及び特徴は、当業者には、記載を吟味すれば明らかであるか、又は本発明の実施により学ぶことができるものである。以下の実施例は、説明を目的として提供されるのであり、本発明の範囲を限定することを意図していない。さらには、本発明は、本明細書に記載される特定の及び好ましい実施態様のすべての可能な組み合わせを網羅する。

0093

分取ＨＰＬＣ精製方法の一般的手順：
ＨＰＬＣ測定が、Ｇｉｌｓｏｎ２８１〜２３３ポンプ（二値）、オートサンプラー、及びＵＶ検出器を用いて実行された。分画はＬＣ−ＭＳによって検出された。ＭＳ検出器はエレクトロスプレーイオン化源を含むように構成された。イオン化源の温度は３００〜３５０℃に維持された。

0094

方法１
Ｌｕｎａ Ｃ１８（１００×３０ｍｍ；４ｕｍ）で逆相ＨＰＬＣが実行された。溶媒Ａ：０．０７５％のトリフルオロ酢酸を含む水；溶媒Ｂ：０．０７５％のトリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル。勾配：室温において、２５ｍＬ／分で６分以内に２０％のＢを４０％のＢへ；次いで２５ｍＬ／分で２分間、４０％のＢ、ＵＶ検出器。

0095

実施例では、以下の略語が使用されている：
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＰＥ：石油エーテル
ＡＥ／ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＡＣＮ：アセトニトリル
ｒ．ｔ．：室温
Ｒｔ：保持時間
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＬＤＡリチウムジイソプロピルアミド
ＥＤＣ．ＨＣｌ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＨＯＢｔ：ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２：Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）アミン
ＭｅＯＨ：メタノール
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ｍ−ＣＰＢＡ：メタクロロ過安息好酸
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド

0096

合成経路１ａ

条件：ａ．ＤＭＦ中、Ｋ２ＣＯ３（２当量）、ＣＨ３Ｉ（１．５当量）、ｒ．ｔ．；ｂ．ＴＨＦ中ＬＤＡ（１．２５Ｍ）、−７８℃で１時間；次いで、Ｒ−０２（２当量）、−７８℃で１時間；ｃ．ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２）中ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０当量）、ｒ．ｔ．；ｄ．ＤＭＦ中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（２当量）、ＨＯＢｔ（２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（１．５当量）、ＮＭＭ（３当量）、ｒ．ｔ．；ｅ．Ｒ−０４（１．５〜３当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２〜３当量）、９０℃で１２時間；ｅ’．ＤＣＭ中ｍ−ＣＰＢＡ（４当量）、ｒ．ｔ．（Ｑ＝Ｓ〜Ｑ’＝ＳＯ２）；ｆ．−ＨＣｌ／ジオキサン、ｒ．ｔ．で１時間。

0097

上記スキーム中、ＱはＯ又はＳであり、Ｑ’はＱ又はＳＯ２であり、Ｃｙは、フェニル又は５〜６員ヘテロアリールであり、置換されていてもよい。

0098

中間体Ｉ−０１ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＤＭＦ（２００ｍＬ）中、Ｗｕｘｉ Ａｐｐｔｅｃ社から市販されている８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸（２０ｇ、０．０７１ｍｏｌ）の溶液に対し、Ｋ２ＣＯ３（１８．５９ｇ、２当量）を加え、次いで化合物ＣＨ３Ｉ（１４．３４ｇ、１．５当量）を液滴で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色のオイルとして粗化合物８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル（２０．３８ｇ、９７．０９％）を生じさせ、これをそれ以上精製することなく次の工程のために使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ１６Ｈ２７ＮＯ４の計算値２９８。

0099

試薬Ｒ−０２ａの調製：４−フルオロベンゼンスルホニルフルオリド
ＡＣＮ（５００ｍＬ）中、化合物４−フルオロベンゼンスルホニルクロリドの溶液（５０ｇ、０．２５６ｍｏｌ）に対し、ＫＦ（７４．３６ｇ、５当量）及び１８−クラウン−６（２ｇ）を室温で加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、ＬＣ−ＭＳにより検出し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、ＥｔＯＡｃを用いて混合物を抽出し、有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色のオイルとして粗化合物４−フルオロベンゼンスルホニルフルオリド（４６．７０ｇ）を生じさせ、これをそれ以上精製することなく次の工程のために使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ６Ｈ４Ｆ２Ｏ２Ｓの計算値１７９。

0100

中間体Ｉ−０２ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中化合物Ｉ−０１ａ（１８．３８ｇ、０．０６２ｍｏｌ）の溶液に対し、−７８℃でＬＤＡ（１０２ｍＬ、１．２５Ｍ）を加えた。−７８℃で１時間撹拌した後、化合物４−Ｆｌｕフルオロベンゼンスルホニルフルオリド（２２．２３ｇ、２当量）を溶液に加え、反応物を−７８℃で１時間撹拌し、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１００：１〜１０：１を用いた溶出）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な化合物Ｉ−０２ａ（１８．９４ｇ、６７．０３％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２２Ｈ３０ＦＮＯ６Ｓの計算値４５６。

0101

中間体Ｉ−０３ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２、８０ｍＬ）中、化合物Ｉ−０２ａ（１０ｇ、０．０２２ｍｏｌ）の溶液に対し、ＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ（９．２３ｇ、１０当量）を加えた。結果として得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、出発物質が完全に消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を水で希釈し、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨを２〜３に調整し、混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色のオイルとして粗生成物Ｉ−０３ａ（９．６０ｇ、９８．９７％）を生じさせ、これを次の段階で使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２１Ｈ２８ＦＮＯ６Ｓの計算値４４２。

0102

中間体Ｉ−０４ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中、化合物Ｉ−０３ａ（９．６０ｇ、０．０２２ｍｏｌ）の溶液に対し、ＥＤＣ．ＨＣｌ（８．４０ｇ、２当量）、ＨＯＢｔ（５．８５ｇ、２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（３．８６ｇ、１．５当量）、ＮＭＭ（６．６７ｇ、３当量）を室温で加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗組成物を生じさせ、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ ＝ ５０：１〜２：１で溶出）により精製し、薄黄色固体として純粋な化合物Ｉ−０４ａ（９．０ｇ、７５．７６％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２６Ｈ３７ＦＮ２Ｏ７Ｓの計算値５４１。

0103

中間体Ｉ−０５ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（５ｍＬ）中、化合物Ｉ−０４ａ（２００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ｐ−メトキシフェノール（６９ｍｇ、１．５当量）及びＣｓ２ＣＯ３（２４１ｍｇ、２当量）を加え、次いで反応混合物を９０℃で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ ２：１）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な化合物Ｉ−０５ａ（１５０ｍｇ、６３．０３％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３３Ｈ４４Ｎ２Ｏ９Ｓの計算値６４５。

0104

化合物１−０３の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ／Ｌ、５ｍＬ）中、中間体Ｉ−０５ａ（１５０ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製して赤色固体として純粋な化合物１−０３（５０ｍｇ、４６．７３％）を得た。Ｒｔ：２．６３、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ２８Ｎ２Ｏ６Ｓの計算値４６１。

0105

化合物１−５９の調製：３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｎ−ヒドロキシ−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
中間体Ｉ−０４ａから出発して化合物１−０３について記載されたものと同じ工程を経た後、化合物１−５９が得られた。Ｒｔ：２．１１、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ１６Ｈ２１ＦＮ２Ｏ４Ｓの計算値３５６。

0106

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−０３の場合と同じ合成経路１ａに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0107

合成経路２ａ

条件：ｃ．Ｒ−０４（１．５〜３当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２〜３当量）、９０℃で１２時間；ｄ．ジオキサン（４Ｍ）中ＨＣｌ、室温；ｅ．Ｋ２ＣＯ３（２当量）、ＡＣＮ中Ｒ−０８（１．５当量）、室温；ｆ．ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２）中ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０当量）、室温；ｇ．ＤＭＦ中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（２当量）、ＨＯＢｔ（２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（１．５当量）、ＮＭＭ（３当量）、室温；ｈ．−ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間。

0108

上記スキーム中、ＱはＯ又はＳであり；Ｘはハロゲンであり；Ｒ’は置換されていてもよい炭化水素鎖であり；Ｃｙは、フェニル又は５〜６員のヘテロアリールであり、置換されていてもよい。

0109

中間体Ｉ−０６ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中、化合物Ｉ−０２ａ（９００ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）の溶液に対し、Ｃｓ２ＣＯ３（１．９２ｇ、５．９ｍｏｌ）及び４−メトキシフェノール（４９０ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を６０℃で２時間撹拌した。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ：ＰＥ＝１：３０〜１：５）により精製し、薄黄色のオイルとして化合物Ｉ−０６ａ（６００ｍｇ、５４．０％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２９Ｈ３７ＮＯ８Ｓの計算値５６０．

0110

中間体Ｉ−０７ａの調製：３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６ｍＬ）中、化合物Ｉ−０６ａ（５００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮することにより化合物Ｉ−０７ａ（５００ｍｇ、粗製）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２４Ｈ２９ＮＯ６Ｓの計算値４６１。

0111

中間体Ｉ−０８ａの調製：３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中、中間体Ｉ−０７ａ（１８１ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に対し、Ｋ２ＣＯ３（１０７ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）、ＭｅＩ（２８ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。出発物質の多くが消費されたことがＴＬＣにより示された後、混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより薄黄色のオイルとして粗化合物Ｉ−０８ａ（１１０ｍｇ、５９．７％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２６Ｈ３３ＮＯ６Ｓの計算値５８８。

0112

中間体Ｉ−０９ａの調製：３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２、８ｍＬ）中、中間体Ｉ−０８（１１０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１９５ｍｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加えた。結果として得られた混合物を一晩還流させた。出発物質の大部分が完全に消費されたことがＴＬＣにより示された後、混合物を、水で希釈し、ｐＨを２〜３に調整した。混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色固体として粗生成物Ｉ−０９ａ（１００ｍｇ、９４．０％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２４Ｈ２９ＮＯ６Ｓの計算値４６０。

0113

中間体Ｉ−１０ａの調製：３−［４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル］−８−メチル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、中間体Ｉ−０９ａ（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＥＤＣｌ（８４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５９ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（５１．５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（６６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ：ＰＥ＝１：５０〜１：４）により精製し、薄黄色固体として化合物Ｉ−１０ａ（７８ｍｇ、６４．０％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２９Ｈ３８Ｎ２Ｏ７Ｓの計算値５５９。

0114

化合物１−０４の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−（４−メトキシフェノキシ）−フェニルスルホニル］−８−メチル−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ／Ｌ、１０ｍＬ）中、中間体Ｉ−１０ａ（７８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で３時間撹拌し、反応混合物を濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製して薄黄色固体として純粋な化合物１−０４（１４．７ｍｇ、２２．０％）を得た。Ｒｔ：２．６６、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２４Ｈ３０Ｎ２Ｏ６Ｓの計算値４７５。

0115

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−０４の場合と同じ合成経路２ａに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0116

合成経路１ｂ

条件：ｅ．Ｒ−０５（４当量）、ＮａＨ（０〜４当量）、３０分後室温で、９０℃で１２時間；ｆ．−ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間

0117

上記スキーム中、Ｒは、置換されていてもよい炭化水素鎖である。

0118

中間体Ｉ−１１ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−［２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ］フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（５ｍＬ）中、２−（ピペリジン−１−イル）エタノール（１９１ｍｇ、４当量）の溶液に対してＮａＨ（３６ｍｇ、４当量）を加え、次いで混合物を室温で０．５時間にわたり撹拌し、中間体Ｉ−０４ａ（２００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応混合物を９０℃で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ ＝ ２：１）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な中間体Ｉ−１１ａ（１８４ｍｇ、７６．６７％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３３Ｈ５１Ｎ３Ｏ８Ｓの計算値６５０。

0119

化合物１−１１の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−［２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ］フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（５ｍＬ）中、中間体Ｉ−１１ａ（１８０ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製し、薄黄色固体として純粋な化合物１−１１（５８．４０ｍｇ、４５．２７％）を得た。Ｒｔ：２．１４。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ３５Ｎ３Ｏ５Ｓの計算値４６６。

0120

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−１１の場合と同じ合成経路１ｂに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0121

合成経路１ｃ

条件：ｅ．Ｒ−０７（１０当量）、１００℃で１２時間、ｆ．−ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間

0122

上記スキーム中、Ｒ’はＲ又はＨであり、Ｒは置換されていてもよい炭化水素鎖である。

0123

中間体Ｉ−１２ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−［４−（４−メトキシピペリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
中間体Ｉ−０４ａ（１００ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）、及び４−メトキシピペリジン（２１３ｍｇ、１０当量）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ １：１）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な中間体Ｉ−１２ａ（５０ｍｇ、４２．７４％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３２Ｈ４９Ｎ３Ｏ８Ｓの計算値６３６。

0124

化合物１−１６の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−（４−メトキシピペリジン−１−イル）フェニルスルホニル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）中、中間体Ｉ−１２ａ（５０ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製し、薄黄色固体として純粋な化合物１−１６（２５．０ｍｇ、６９．４４％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２２Ｈ３３Ｎ３Ｏ５Ｓの計算値４５２。

0125

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−１６の場合と同じ合成経路１ｃに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0126

合成経路１ｄ

条件：ｅ．ベンジルアルコール（４当量）、ＮａＨ（４当量）、室温で３０分後、９０℃で１２時間；ｆ．−Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）、水素雰囲気、室温で１時間；ｇ．ＤＣＭ中、−Ｒ−０９（１．２当量）、Ｅｔ３Ｎ（３当量）、室温で一晩；ｈ．−ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間

0127

上記スキーム中、Ｒは、置換されていてもよい炭化水素鎖、置換されていてもよい炭素環式又はヘテロ脂肪族の環、置換されていてもよいフェニル又は５〜６員ヘテロアリールである。

0128

中間体Ｉ−１３ａの調製：３−［４−（ベンジルオキシ）フェニルスルホニル］−８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＴＨＦ（５ｍＬ）中、フェニルメタノール（５００ｍｇ、５当量）の溶液に対しＮａＨ（１１０ｍｇ、５当量）を加え、次いで混合物を室温で０．５時間撹拌し、中間体Ｉ−０４ａ（５００ｍｇ、０．９２６ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応混合物を８０℃で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ ２：１）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な中間体Ｉ−１３ａ（３８０ｍｇ、６５．２９％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３３Ｈ４４Ｎ２Ｏ８Ｓの計算値６２９。

0129

中間体Ｉ−１４ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−［４−ヒドロキシフェニルスルホニル］−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中、中間体Ｉ−１３ａ（３８０ｍｇ、０．６０５ｍｍｏｌ）の溶液に対し、Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）を室温及び水素雰囲気で加え、次いで、出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示されるまで、混合物を、室温で１時間撹拌し、次いで濾過し、濾液を濃縮することにより粗組成物Ｉ−１４ａ（１８０ｍｇ、５５．３８％）を生じさせ、これをそれ以上精製することなく次の工程のために使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２６Ｈ３８Ｎ２Ｏ８Ｓの計算値５３９。

0130

中間体Ｉ−１５ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−［４−（４−メトキシベンゾイルオキシ）フェニルスルホニル］−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＣＭ（５ｍＬ）中、中間体Ｉ−１４ａ（６０ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（４６ｍｇ、３当量）の溶液に対し、４−メトキシベンゾイルクロリド（３１ｍｇ、１．２当量）を室温で加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ２：１）により示された後、混合物をＤＣＭを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ ２：１）で生成することにより、薄黄色のオイルとして純粋な化合物Ｉ−１５ａ（３８ｍｇ、３７．６２％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３４Ｈ４４Ｎ２Ｏ１０Ｓの計算値６７３。

0131

化合物１−２６の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−（４−メトキシベンゾイルオキシ）フェニルスルホニル］−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（５ｍＬ）中、中間体Ｉ−１５ａ（３８ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間撹拌し、次いで濃縮して分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により粗生成物を生じさせて、薄黄色固体として純粋な化合物Ｉ−２６（２２ｍｇ、７８．５７％）を得た。Ｒｔ：２．７１、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２４Ｈ２８Ｎ２Ｏ７Ｓの計算値４８９。

0132

化合物１−６０の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−ヒドロキシフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
中間体Ｉ−１４ａから出発して化合物１−２６について記載されたものと同じ工程を経た後、化合物１−６０が得られた。Ｒｔ：２．１１、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ１６Ｈ２２Ｎ２Ｏ５Ｓの計算値３５４。

0133

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−２６の場合と同じ合成経路１ｄに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0134

合成経路１ｅ

条件：ａ．ＴＨＦ中ＬＤＡ（２．０Ｍ）、−７８℃で１時間；次いでＲ−１０（１．２当量）、−７８℃で１時間；ｂ．ジオキサン／Ｈ２Ｏ中、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．１当量）及びＮａ２ＣＯ３（２当量）、室温で一晩；ｃ．ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２）中、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０当量）、室温．；ｄ．ＤＭＦ中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（２当量）、ＨＯＢｔ（２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（１．５当量）、ＮＭＭ（３当量）、室温；ｅ．−ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間。

0135

上記スキーム中、Ｂは、ボロン酸、ボロン酸エステル、又はトリフルオロホウ酸塩であり、Ｒは、フェニル又は５〜６員ヘテロアリール又は３〜７の複素環式又炭素環式脂肪族環又は炭化水素鎖であり、置換されていてもよい。

0136

試薬Ｒ−１０ａの調製：４−ブロモベンゼンスルホニルフルオリド
ＣＨ３ＣＮ（４５ｍＬ）中、４−ブロモベンゼンスルホニルクロリド（２．２９ｇ、９ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＫＦ（２．１ｇ、３６ｍｍｏｌ）及び１８−クラウン−６（０．５ｇ）を加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムにより精製して薄黄色固体として試薬Ｒ−１０ａ（１．６ｇ、７４．４％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ６Ｈ４ＢｒＦＯ２Ｓの計算値２３９．２。

0137

中間体Ｉ−１６ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−ブロモフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、化合物Ｉ−０１ａ（２３０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＬＤＡ（０．６ｍＬ、２．０Ｍ、１．２ｍｍｏｌ）を−７８℃で加えた。−７８℃で１時間撹拌した後、試薬Ｒ−１０ａ（２１４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を溶液に加え、反応物を−７８℃で１時間撹拌し、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせて、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１００：１〜１０：１で溶出）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な化合物Ｉ−１６ａ（１５０ｍｇ、３８％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２２Ｈ３０ＢｒＮＯ６Ｓの計算値４５９．９。

0138

中間体Ｉ−１７ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−（４−メトキシフェニル）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ジオキサン（１０ｍＬ）／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）中、化合物Ｉ−１６ａ（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、及び市販の４−メトキシフェニルボロン酸（２０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、Ｒ−１１）の懸濁液に対し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１０ｍｇ）、及びＮａ２ＣＯ３（２２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２下において還流で一晩撹拌した。結果として得られた混合物を室温まで冷却し、水を加えた。有機層を分離し、ＥｔＯＡｃを用いて水層を３回抽出した。組み合わせた有機層を、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮し、分取ＴＬＣにより精製することにより、所望の生成物Ｉ−１７ａ（５２ｍｇ、９５％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２９Ｈ３７ＮＯ７Ｓの計算値４８８．０。

0139

中間体Ｉ−１８ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−（４−メトキシフェニル）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２、８ｍＬ）中、化合物Ｉ−１７ａ（５２ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（４２ｍｇ、１０当量）を加えた。結果として得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、出発物質が完全に消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、水で希釈し、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨを３〜４に調整し、混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色のオイルとして粗生成物Ｉ−１８ａ（５０ｍｇ、〜１００％）を生じさせ、これを直接次の工程で使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２８Ｈ３５ＮＯ７Ｓの計算値；４７３．９

0140

中間体Ｉ−１９ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−（４−メトキシフェニル）フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中、化合物Ｉ−１８ａ（５０ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＥＤＣ．ＨＣｌ（４０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２７ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＴＨＰＯＮＨ２（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（４０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＴＬＣにより精製することにより薄黄色固体として化合物Ｉ−１９ａ（４５ｍｇ、７２％）を生じさせた。ＥＳＩ ＭＳ（Ｍ−１３９）：Ｃ３３Ｈ４４Ｎ２Ｏ８Ｓの計算値；４８８．９

0141

化合物１−４１の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（４−メトキシフェニル）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ、２Ｎ）中、中間体Ｉ−１９ａ（４５ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で２時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣにより二回（一般的手順、方法１）精製し、黄色固体として純粋な化合物１−４１（６．６ｍｇ、１６．８％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ２８Ｎ２Ｏ５Ｓの計算値４４５．２。Ｒｔは２．０１である。

0142

下記の表において別途指示がない限り、化合物１〜４１の場合と同じ合成経路１ｅに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0143

合成経路１ｆ

条件：ａ．ＤＣＭ中、Ｒ−０９（１．２当量）、Ｅｔ３Ｎ（２当量）、室温で一晩；ｂ．ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間

0144

上記スキーム中、Ｒ及びＲ’は水素であり、Ｘはハロゲンであり、Ｒ’’は、フェニル又は５〜６員ヘテロアリール又は３〜７の複素環式又は炭素環式脂肪族環又は炭化水素鎖であり、置換されていてもよい。

0145

中間体Ｉ−２０ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−（シクロヘキサンカルボニルアミノ）フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＣＭ（３ｍＬ）中、化合物Ｉ−１２ｃ（８０ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）、１−６１を合成するために（合成経路１ｃに従って）得た中間体の溶液に対しシクロヘキサンカルボニルクロリド（２６．２ｍｇ、１．２当量）及びＥｔ３Ｎ（３０．１ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応混合物を室温で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗化合物を生じさせ、これを分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ ５：１）によって精製することにより、白色固体として純粋な中間体Ｉ−２０ａ（６５ｍｇ、６７．５０％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ３３Ｈ４９Ｎ３Ｏ８Ｓの計算値６４８．３。

0146

化合物１−８１の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（４−（シクロヘキサンカルボニルアミノ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）中、化合物Ｉ−２０ａ（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製し、黄色固体として純粋な化合物１−８１（２２．０ｍｇ、４５．７４％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ３３Ｎ３Ｏ５Ｓの計算値４６４．２。Ｒｔは１．８９である。

0147

合成経路３ａ

条件：ａ．ＴＨＦ中、ＬＤＡ（１．２０Ｍ）、−７８℃で１時間、次いで、Ｒ−１２（１．２当量）、−７８℃で１時間；ｂ．ＴＨＦ中、Ｒ−１３（３〜１０当量）、ＮａＨ（０〜３当量）、室温−一晩還流；ｃ．ＤＭＦ中、ＣｕＩ（２当量）、ＭｅＯＨ／ＭｅＯＮａ（２５％、２０当量）、１１０℃で２０分；ｄ．ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２）中、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０当量）、室温；ｅ．ＤＭＦ中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（２当量）、ＨＯＢｔ（２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（１．５当量）、ＮＭＭ（３当量）、室温．；ｆ．ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間。

0148

上記スキーム中、ＱはＯ又はＮＨであり、Ｒは、３〜７の複素環式又は炭素環式の脂肪族環又は炭化水素鎖であって置換されていてもよく、Ｒ’はハロゲン又はアルコキシである。

0149

試薬Ｒ−１２ａの調製：３−クロロ−４−フルオロベンゼンスルホニルフルオリド
ＣＨ３ＣＮ（４０ｍＬ）中、市販の３−クロロ−４−フルオロベンゼンスルホニルフルオリド（７ｇ、３０ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＫＦ（７ｇ、１２０ｍｍｏｌ）及び１８−クラウン−６（０．５ｇ）を加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムにより精製し、薄黄色固体として試薬Ｒ−１２ａ（４．２ｇ、９５．５％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ６Ｈ３Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値２１３．２。

0150

中間体Ｉ−２１ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−フルオロフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、化合物Ｉ−０１ａ（７４３ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＬＤＡ（４．２ｍＬ、１．２Ｍ、５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加えた。−７８℃で１時間撹拌した後、試薬Ｒ−１２ａ（６４０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を溶液に加え、反応物を−７８℃で１時間撹拌し、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。出発物質が消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これをカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１００：１〜１０：１で溶出）により精製し、薄黄色のオイルとして純粋な中間体Ｉ−２１ａ（３４９ｍｇ、２９％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２２Ｈ２９ＣｌＦＮＯ６Ｓの計算値４３４．１。

0151

中間体Ｉ−２２ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−（シクロヘキシルアミノ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
中間体Ｉ−２１ａ（２４０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を、シクロヘキシルアミン（５０５ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）、Ｒ１３ａ中で溶解させた。溶液を８５℃で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＴＬＣにより精製し、薄黄色固体として化合物Ｉ−２２ａ（１１０ｍｇ、３８％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２８Ｈ４１ＣｌＮ２Ｏ６Ｓの計算値；５１３。

0152

中間体Ｉ−２４ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−メトキシ−４−（シクロヘキシルアミノ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸
化合物Ｉ−２２ａ（１７９ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１２４．５ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）、及びＭｅＯＨ／ＭｅＯＮａ（２５％、１．４１ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解させた。溶液を１１０℃で２０分間撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取りＴＬＣにより精製することで、薄黄色固体として化合物Ｉ−２４ａ（１６０ｍｇ、８８％）を生じさせた。メチルエステルの、対応するカルボン酸への加水分解が、メトキシル化と同時に起こった；すなわち、化合物Ｉ−２３ａは単離されず、中間体Ｉ−２４ａは直接Ｉ−２２ａから得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２８Ｈ４２Ｎ２Ｏ７Ｓの計算値；４９５．２

0153

中間体Ｉ−２５ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−メトキシ−４−（シクロヘキシルアミノ）フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中、化合物Ｉ−２４ａ（１６０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１１２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７９ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、ＴＨＰＯＮＨ２（６８ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、及びＮＭＭ（８８ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を室温で加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＴＬＣにより精製し、薄黄色固体として中間体Ｉ−２５ａ（１００ｍｇ、５３％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−１３９）：Ｃ３３Ｈ５１Ｎ３Ｏ８Ｓの計算値；５１０．１

0154

化合物１−９０の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（３−メトキシ−４−（シクロヘキシルアミノ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）中、化合物Ｉ−２５ａ（１００ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液を室温で２時間撹拌し、次いで濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製し、白色固体として純粋な化合物１−９０（３９．７ｍｇ、５８％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ３５Ｎ３Ｏ５Ｓの計算値４６６．１。Ｒｔは２．４８である。

0155

化合物１−１１６の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（３−クロロ−４−フルオロフェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
化合物１−９０について記載したものと同じ方法に従い、但し上記合成経路（３ａ）から第２及び第３の工程（ｂ及びｃ）を省略して、化合物１−１１６を得た。Ｒｔは２．９６であり、ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ１６Ｈ２０ＣｌＦＮ２Ｏ４Ｓの計算値３９１．２。

0156

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−９０の場合と同じ合成経路３ａに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0157

合成経路３ｂ

条件：ａ．Ｒ−０４（１．５〜３当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２〜３当量）、９０℃で１２時間；ｂ．ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２）中、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１０当量）、室温．；ｃ．ＤＭＦ中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（２当量）、ＨＯＢｔ（２当量）、ＴＨＰ−Ｏ−ＮＨ２（１．５当量）、ＮＭＭ（３当量）、室温．；ｄ．ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間。

0158

上記スキーム中、ＱはＯ又はＳであり、Ｃｙは、フェニル又は５〜６員ヘテロアリールであり、置換されていてもよい。

0159

中間体Ｉ−２６ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸メチルエステル
ＤＭＦ（５ｍＬ）中、化合物Ｉ−２１ａ（４２０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、及びｐ−メトキシフェノール（２１４ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液に対し、Ｃｓ２ＣＯ３（７００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２下において還流で一晩撹拌した。結果として得られた混合物を室温まで冷却し、水を加えた。有機層を分離し、ＥｔＯＡｃを用いて水層を３回抽出した。組み合わせた有機層を、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮し、分取ＴＬＣで精製することにより、所望の生成物Ｉ−２６ａ（３８０ｍｇ、７５％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２９Ｈ３６ＣｌＮＯ８Ｓの計算値５３８．２。

0160

中間体Ｉ−２７ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボン酸
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３／３／２、１６ｍＬ）中、化合物Ｉ−２６ａ（３１０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（２２５ｍｇ、１０当量）を加えた。結果として得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、出発物質が完全に消費されたことがＴＬＣ（ＰＥ／ＡＥ５：１）により示された後、混合物を、水で希釈し、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨを３〜４に調整し、ＥｔＯＡｃを用いて洗浄し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、分取ＴＬＣにより精製することで、所望の生成物Ｉ−２７ａ（１２０ｍｇ、４０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−５５）：Ｃ２８Ｈ３４ＣｌＮＯ８Ｓの計算値：５２４．２。

0161

中間体Ｉ−２８ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、中間体−２７ａ（１２０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＥＤＣ．ＨＣｌ（８１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＴＨＰＯＮＨ２（５０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（６４ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、薄黄色のオイルとして粗生成物Ｉ−２８ａ（１６０ｍｇ、〜１００％）を生じさせ、これを直接次の工程で使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−１３９）：Ｃ３３Ｈ４３ＣｌＮ２Ｏ９Ｓの計算値；５３９．２。

0162

化合物１−５６の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（３−クロロ−４−（４−メトキシフェノキシ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ、１Ｎ）中、中間体Ｉ−２８ａ（１６０ｍｇ、〜０．２１ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２時間撹拌し、次いで濃縮して粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製することで、黄色固体として純粋な化合物１−５６（３０．８ｍｇ、２９．７％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２３Ｈ２７ＣｌＮ２Ｏ６Ｓの計算値４９５．２。Ｒｔは２．６６である。

0163

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−５６の場合と同じ合成経路３ｂに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0164

合成経路３ｃ


条件：ａ．ＤＣＭ中、Ｒ−０９（１．２当量）、Ｅｔ３Ｎ（４当量）、室温で一晩；ｂ．ＨＣｌ／ジオキサン、室温で１時間

0165

上記スキーム中、ＱはＯ又はＮＨであり、Ｒは水素であり、Ｘはハロゲンであり、Ｒ’は、フェニル、又は５〜６員ヘテロアリール、又は３〜７の複素環式又は炭素環式脂肪族環、又は炭化水素鎖であり、置換されていてもよい。

0166

中間体Ｉ−２９ａの調製：８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−クロロ−４−（４−（トリフルオロメトキシ）ベンゾイルオキシ）フェニルスルホニル）−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、化合物Ｉ−２５ｅ（１１５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、１−１２１を合成するために（合成経路３ａに従って）得られた中間体、及びＥｔ３Ｎ（６１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＤＣＭ（５ｍＬ）中、市販の４−（トリフルオロメトキシ）ベンゾイルクロリド、Ｒ−０９（０．３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下において０℃で撹拌しながら液滴で加えた。混合物溶液を室温で一晩撹拌した。混合物溶液に水を加え、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、有機層を、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより粗生成物を生じさせ、これを分取ＴＬＣにより精製することで黄色固体として中間体Ｉ−２９ａ（４０ｍｇ、２６％）を生じさせた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ−１３９）：Ｃ３４Ｈ４０ＣｌＦ３Ｎ２Ｏ１０Ｓの計算値；６２１．１。

0167

化合物１−１２８の調製：Ｎ−ヒドロキシ−３−（３−クロロ−４−（４−（トリフルオロメトキシ）ベンゾイルオキシ）フェニルスルホニル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−３−カルボキサミド
ＨＣｌ／ジオキサン（１５ｍＬ、１Ｎ）中、中間体Ｉ−２９ａ（４０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で４時間撹拌し、次いで濃縮して粗生成物を生じさせ、これを分取ＨＰＬＣ（一般的手順、方法１）により精製することで、黄色固体として純粋な化合物１−１２８（１１．２ｍｇ、３７％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：Ｃ２４Ｈ２４ＣｌＦ３Ｎ２Ｏ７Ｓの計算値５７７．２。Ｒｔは２．９６である。

0168

下記の表において別途指示がない限り、化合物１−１２８の場合と同じ合成経路３ｃに従い、且つ同じ試薬を使用して、以下の化合物を得た：

0169

合成された化合物はラセミ混合物として得られる。対応する異性体を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）により精製することで、各ラセミ化合物から二つの鏡像異性体が得られる。

0170

超臨界流体クロマトグラフィ（ＳＦＣ）の手順：
調製に利用したＳＦＣ分離法に関する詳細は以下のとおりである：

0171

方法１：
−機器：ＴｈａｒＳＦＣＰｒｅ−８０
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２５０×３０ｍｍＩ．Ｄ．
−移動相：ＣＯ２の場合Ａ、及びエタノール（０．１％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ）の場合Ｂ
−勾配：Ｂ ５０％
−流量：６０ｍＬ／分
−逆圧：１００ｂａｒ
−カラム温度：４０℃
−波長：２２０ｎｍ
−サイクル時間：〜２０分
−試料調製：化合物をエタノールに溶解させて〜１２ｍｇ／ｍＬとした。
−注入：注入一回当たり２．０ｍＬ

0172

方法２：
−機器：ＭｇII調製用ＳＦＣ
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２５０×３０ｍｍＩ．Ｄ．
−移動相：ＣＯ２の場合Ａ、及びメタノール（０．１％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ）の場合Ｂ
−勾配：Ｂ ５０％
−流量：４０ｍＬ／分
−逆圧：１００ｂａｒ
−カラム温度：３８℃
−波長：２２０ｎｍ
−サイクル時間：〜２０分
−試料調製：化合物をメタノールに溶解させて〜１３ｍｇ／ｍＬとした。
−注入：注入一回当たり３．５ｍＬ

0173

方法３：
−機器：ＭｇII調製用ＳＦＣ
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２５０×３０ｍｍＩ．Ｄ．
−移動相：ＣＯ２の場合Ａ、及びＩＰＡ（０．１％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ）の場合Ｂ
−勾配：Ｂ ３５％
−流量：５５ｍｌ／分
−逆圧：１００ｂａｒ
−カラム温度：３８℃
−波長：２５４ｎｍ
−サイクル時間：〜８分
−試料調製：化合物をメタノールに溶解させて〜５ｍｇ／ｍＬとした。
−注入：注入一回当たり１．０ｍＬ

0174

分離後、浴温４０℃でロータリーエバポレーターを介して分画を乾燥させることにより所望の異性体を得た。次いで、濃縮後、両方の鏡像異性体の鏡像体過剰率（ｅ．ｅ．）を、後述する分析分離法の下で試験した：

0175

方法１：
−機器：ＳＨＩＭＡＤＺＵ−２０Ａ ＵＦＬＣ
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−３、１００×４．６ｍｍ
−移動相：ヘキサン（０．１％ＩＰＡｍ）の場合Ａ、及びエタノール（０．０５％ＩＰＡｍ）の場合Ｂ
−勾配：４０％
−流量：１．０ｍＬ／分
−カラム温度：３０℃
−波長：２２０ｎｍ

0176

方法２：
−機器：分析ＳＦＣ
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２５０×４．６ｍｍ
−移動相：ＣＯ２の場合Ａ、及びメタノール（０．０５％ＤＥＡ）の場合Ｂ
−勾配：５０％
−流量：２．０ｍＬ／分
−逆圧：１００ｂａｒ
−カラム温度：３５℃
−波長：２２０ｎｍ

0177

方法３：
−機器：Ｔｈａｒ分析ＳＦＣ
−カラム：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＤ−Ｈ、２５０×４．６ｍｍ
−移動相：ＣＯ２の場合Ａ、及びＩＰＡ（０．１％エタノールアミン）の場合Ｂ
−勾配：３０％
−流量：２．４ｍＬ／分
−逆圧：１００ｂａｒ
−カラム温度：３５℃
−波長：２２０ｎｍ

0178

濃縮後、前記に報告されたように、ＬＣ−ＭＳを使用して、両方の鏡像異性体の純度を試験した。次いで、Ａｕｔｏｐｏｌ Ｖ旋光計を使用して、２０℃における旋光度を測定した。

0179

キラル分離後、以下の異性体が得られた：

0180

全血血栓形成及び溶解に対する抗繊維素溶解効果
血栓弾性率測定法（Ｔｈｒｏｍｂｏｅｌａｓｔｏｍｅｔｒｙ）は、全血の止血試験のための粘弾性率測定法である。ＴＥＭ(R)は、凝固とそれに続く溶解の間の凝固因子、阻害剤、及び細胞成分の相互作用を経時的に測定する。この方法のレオロジー条件は、血管内血液の緩慢な流れを模倣する。

0181

検出方法：
午前８〜９時の間に、健常なヒト及びマウスから、クエン酸塩溶液（０．１２９Ｍのクエン酸ナトリウム、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ ＢＤ）を含むチューブ内に血液試料を取得し、ＲＯＴＥＭ（登録商標）分析器（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ ＧｍｂＨ、Ｍｕｎｉｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）の技術的詳細に従ってＲＯＴＥＭ試験を実施した。後述するｉｎ−ｔｅｍ試験の修正版を、試験対象化合物の抗繊維素溶解効果、及びクエン酸血中における血小板とのその相互作用の検査のために使用した。
キット：カルシウム再沈着試薬としてのＳＴＡＲＴ−ＴＥＭアッセイ（ｒｅｆ＃５０３−０１）、及び内因性の凝固経路の活性化のためのＩＮ−ＴＥＭアッセイ（ｒｅｆ＃５０３−０２）。

0182

手順：
予め温めたキュベット及びホルダー内に、ＤＭＳＯ中、１μＬの組織プラスミノゲン活性化因子（ｔＰＡ）（１５００００Ｕ／ｍＬ、Ａｃｔｙｌｉｓｅ）、２０μＬのｓｔａｒｔ−ｔｅｍ試薬（ＣａＣｌ２）、２０μＬのｉｎ−ｔｅｍ試薬（凝固系の活性化因子）、３μＬのＤＭＳＯ（コントロール）、又は試験化合物（ＣＭ）と、予め温めた３００μＬのクエン酸血をピペットで取った。試料混合物を含有するカップホルダーを、適切なチャネル上に直に置いた。６０分間血栓形成と溶解を起こさせて、測定値を記録した。

0183

表３は、ヒト血液中の結果を、溶解時間を５０％だけ遅延させるために効果的な濃度（ＥＣ５０ＬＴ）として示し；ここで、アッセイされるすべての濃度（１０００〜０．２μＭ）において、ＥＣ５０ＬＴ≧２５μＭ（＋）、１０μＭ≦ＥＣ５０ＬＴ＜２５μＭ（＋＋）、１μＭ≦ＥＣ５０ＬＴ＜１０μＭ（＋＋＋）、ＥＣ５０ＬＴ＜１μＭ（＋＋＋＋）である。

0184

表４は、マウス血液中の結果を、溶解時間を５０％だけ遅延させるために効果的な濃度（ＥＣ５０ＬＴ）として示し；ここで、アッセイされるすべての濃度（１０００〜０．２μＭ）において、ＥＣ５０ＬＴ≧１０μＭ（＋）、１μＭ≦ＥＣ５０ＬＴ＜１０μＭ（＋＋）、１ｎＭ≦ＥＣ５０ＬＴ＜１μＭ（＋＋＋）、及びＥＣ５０ＬＴ＜１ｎＭ（＋＋＋＋）である。

0185

上記の表（表３及び４）において観察されるように、本発明の化合物は、溶解時間に有意な遅延を示し、それは多くの場合ＴＸＡより大きかった。

0186

ｉｎ ｖｉｖｏでの抗繊維素溶解効果（テイルブリーディングアッセイ（ｔａｉｌ ｂｌｅｅｄｉｎｇ ａｓｓａｙ））
月齢２の野生型Ｃ５７Ｂｌ６（ｎ＝１０）マウスにおいて、尾端を除去することにより出血時間を評価した。マウス（２０−２５ｇ）を２．５％のイソフルレンで麻酔し、加温パッド上で３７℃に維持した。止血剤の有用性を２つのモデル、すなわち、従来の出血モデル、及び超繊維素溶解出血モデルで評価した。

0187

従来の出血モデルは、２％のカルボキシメチルセルロース又は溶媒に溶解させた異なる化合物（４ｍｇ／マウス、１６０ｍｇ／Ｋｇ）の腹腔内注入から構成した。注入の３０分後、手術用メスの刃を用いて尾端を５ｍｍ除去し、尾端を３７℃の生理食塩水１ｍＬに浸した。出血停止までの時間を最長で３０分まで測定した。出血の時間は、最初の切断と出血の目視上の停止との間隔と定義した。結果を表５に示す。

0188

超繊維素溶解出血モデルは、過剰な繊維素溶解により出血時間を引き延ばすために、眼の網状組織中へ０．５ｍｇ／ｋｇのｔＰＡを注入することにより構成した。まず、薬剤投与のために、大腿静脈を露出させ、生理食塩水を充填したポリウレタンのカテーテル（Ｍｉｃｒｏｃａｎｎｕｌａ ７２−９０３０、Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）を用いてカニューレを挿入した。カテーテルを、試験薬剤２００ μＬ（１０％ボーラス、９０％４０分間還流）の注入用注射器ポンプ（ＡＬ−１０００、ＷＰＩ）に接続した。次いで、ｔＰＡ（０．５ｍｇ／ｋｇ）を、目の網状組織に注入し、ｔＰＡ投与の５分後、生理食塩水又は異なる化合物を、大腿カテーテルを通して注入し、すべての薬剤の全身への分布を確認した。基準化合物であるＴＸＡ及びアプロチニンを、それぞれ３００及び１０ｍｇ／Ｋｇで投与した；しかしながら、本発明のすべての化合物は１ｍｇ／Ｋｇで投与された。五分後、手術用のメスの刃を用いて尾端５ｍｍを除去し、尾端を３７℃の生理食塩水１ｍＬに浸した。

0189

出血の時間は、最初の切除と出血の目視上の停止との間隔と定義し、出血の停止は最長で３０分まで測定した。観察期間を超えて出血し続けた動物には、３０分という値が割り当てられた。表６は、結果を、報告された出血時間（ＢＴ）として示しており；ここで、ＢＴ≧２０分（＋）、１０分≦ＢＴ＜２０分（＋＋）、５分≦ＢＴ＜１０分（＋＋＋）、及びＢＴ＜５分（＋＋＋＋）である。出血時間は野生型マウス（Ｃ５７／ＢＩ６）において決定され、ここで、ｎ≧１０／アッセイ対象化合物；したがって、生理食塩水の場合、ＢＴは平均値として報告され、ＢＴは平均±ＥＳＭとして報告される。

0190

表６に示すように、本発明の試験化合物は、コントロール又はＴＸＡと比較したとき、出血時間を極めて顕著に短縮した。いずれの場合も試験化合物の用量はＴＸＡ又はアプロチニンの用量より低かった。

0191

本出願の参照文献
Green and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, Wiley, 3rd ed. 1999, Chapter 2, pp. 17-200 and Chapter 5, pp. 369-451.
D. Bouyssi et al., "Rearrangement of oxaspiroheptanes to cyclohexanones mediated by lithium iodide", Synlett 2000, vol. 5, pp. 749-751.
Osamu Kitagawa et al., "Stereoselective Iodine Atom Transfer [3 + 2] Cycloaddition Reaction with Alkenes Using Unsyｍｍetrical Allylated Active Methine RadicaIs", The Journal of Organic Chemistry 2004, vol. 69, pp. 2607-2610.